內(nèi)蒙古氨基嘧啶基于酶抑制法的酒精飲料中氨基甲酸乙酯的快速檢測(cè)的研究：

氨基甲酸乙酯是一種酒類及發(fā)酵食品在發(fā)酵與貯存過(guò)程中天然產(chǎn)生的致癌物，內(nèi)蒙古氨基嘧啶目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其的檢測(cè)方法主要集中在儀器分析法，這些方法操作復(fù)雜、所用儀器昂貴、耗時(shí)長(zhǎng)，故急需建立一種簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。本論文基于酶抑制原理，研究利用分光光度法快速檢測(cè)酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量，主要包括以下幾個(gè)方面的內(nèi)容： 1、選用Ellman法，在酶活力測(cè)定的pH、溫度和時(shí)間條件下，對(duì)乙酰膽堿酯酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究，描述了乙酰膽堿酯酶的相應(yīng)米氏動(dòng)力學(xué)參數(shù)。研究氨基甲酸乙酯對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制作用，并用溴水（3%）-氫氧化鈉溶液對(duì)氨基甲酸乙酯進(jìn)行預(yù)處理，使其對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制率得以顯著提高，且其抑制程度與濃度呈線性關(guān)系，線性范圍為1mg/L～7.5mg/L。 2、研究乙醇對(duì)乙酰膽堿酯酶酶活力的影響，并分析了在乙醇-水溶液、乙醇-緩沖液中乙酰膽堿酯酶的動(dòng)力學(xué)參數(shù)變化。在乙醇濃度15%的乙醇-緩沖液體系中，對(duì)不同濃度氨基甲酸乙酯對(duì)酶活的抑制率進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)酶的抑制率與氨基甲酸乙酯濃度呈線性相關(guān)，內(nèi)蒙古氨基嘧啶線性范圍在1～5mg/L到2～10mg/L之間。但在乙醇-水體系中酶的抑制率和氨基甲酸乙酯濃度間的線性關(guān)系不存在。初步嘗試采用XDA-1型大孔吸附樹脂對(duì)乙醇進(jìn)行吸附，酒精度下降約3%～4%，吸附效果并不顯著。 3、利用對(duì)二甲氨基苯甲醛法，在酸的用量、顯色劑用量及溫度和時(shí)間的條件下，測(cè)定433nm處吸光度，結(jié)果表明吸光度與氨基甲酸乙酯濃度呈線性關(guān)系，線性范圍為0～1g/L，且方法精密度高。將對(duì)二甲氨基苯甲醛法與酶抑制法結(jié)合，結(jié)果表明，經(jīng)Ehrlich反應(yīng)后的氨基甲酸乙酯對(duì)乙酰膽堿酯酶無(wú)抑制作用。 4、對(duì)廣州市場(chǎng)銷售的中低端酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量進(jìn)行了分析調(diào)查，發(fā)現(xiàn)除啤酒、米酒外，各種酒精飲料中都含有一定濃度的氨基甲酸乙酯，但含量各不相同，平均含量大小依次為白蘭地梅酒黃酒白酒藥酒果酒葡萄酒，其中白蘭地和梅酒中氨基甲酸乙酯含量非常高，部分酒樣高達(dá)2.0846mg/kg、0.7504mg/kg。采用酶抑制法對(duì)酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量進(jìn)行快速檢測(cè)，結(jié)果表明，直接完全地應(yīng)用酶抑制法目前尚不完善，可利用固相萃取結(jié)合酶抑制法，內(nèi)蒙古氨基嘧啶對(duì)酒精飲料中氨基甲酸乙酯含量進(jìn)行定性分析。