三亞氨基嘧啶

近年來,雖有不少分子靶向抗腫瘤藥物進入臨床應用,但由于腫瘤的復雜性、遺傳的多樣性,單一靶向藥物并不足以治愈腫瘤。傳統(tǒng)的DNA損傷藥物雖能延長腫瘤患者的生存期,但因其選擇性差、可引起多種嚴重的毒副作用而限制了其在臨床上的應用。因此,開發(fā)細胞周期相關藥物及其與DNA損傷藥物聯(lián)合用藥的策略已成為抗腫瘤藥物研發(fā)的熱點之一。本論文根據(jù)文獻報道的細胞周期檢查點激酶1(Chk1)抑制劑的結構特征及其與Chk1蛋白的結合模式,應用生物電子等排原理,設計合成了 28個噻吩駢吡啶酮類衍生物。體外Chk1抑制活性結果表明:大部分化合物顯示出中等到強的Chk1抑制活性。其中,10個化合物的IC50值小于10 nM,并討論了其構效關系。同時,部分化合物對相關激酶具有較好的選擇性。3個代表性化合物1-65,1-68及1-71單獨用藥未表現(xiàn)出明顯的細胞毒性,但均能顯著增強DNA損傷藥物美法侖對RPMI-8226細胞株的增殖抑制活性。內蒙古氨基嘧啶在新一輪的結構改造過程中,結合文獻報道的另一個吲哚-喹啉酮類化合物2-1,采用骨架遷越的原理,初步設計合成了 4個3-吲哚吡啶酮類化合物,并進行了體外Chk1抑制活性測試。遺憾的是這4個化合物對Chk1激酶均沒有明顯的抑制作用。在對化合物2-22進行其它激酶靶點(IKKβ、CDK2/cyclinA、Aurora A及PKC)的活性篩選過程中發(fā)現(xiàn),其具有一定的Aurora A抑制作用(IC50= 1.23μM)。為尋找全新母核結構的Chk1抑制劑,我們采用計算機輔助藥物設計技術構建了基于晶體結構的Chk1抑制劑的虛擬篩選模型。在利用該模型對Chembridge數(shù)據(jù)庫及實驗室內部化合物庫進行虛擬篩選的基礎上,內蒙古嘧啶結合生物活性測試,發(fā)現(xiàn)了對Chk1具有中等抑制活性的N-取代吡啶-2-氨基嘧啶類衍生物MCL1020。進而根據(jù)其結構特征,結合骨架遷越等理性藥物設計方法對MCL1020進行了結構優(yōu)化,設計合成了 62個N-取代吡啶/嘧啶-2-氨基嘧啶類衍生物。Chk1抑制活性測試結果表明:大部分化合物顯示出中等到強的Chk1抑制活性。其中,25個化合物的IC50值小于10 nM。4個代表性化合物分別與Gemcitabine聯(lián)合用藥均能顯著增強Gemcitabine對SW620細胞株的增殖抑制活性。Western blotting實驗結果表明,化合物3-94在0.1和0.5 μM濃度下均能抑制Gemcitabine誘導的Chk1蛋白(S296)的磷酸化。對10個Chk1抑制活性較好的化合物進行了體外5種不同的血液腫瘤細胞株的增殖抑制作用篩選,內蒙古玉嘧磺胺發(fā)現(xiàn)該類化合物對人急性髓系白血病MV-4-11細胞株具有較強的增殖抑制作用,與陽性對照AZD7762活性相當,并對其它4種腫瘤細胞株表現(xiàn)出了 一定的選擇性。為考察該類化合物的成藥性,對4個代表性化合物進行了體外鼠肝微粒體穩(wěn)定性及MDCK跨膜轉運能力測試,結果表明,4個化合物在鼠肝微粒體中穩(wěn)定,且具有良好的透膜能力。綜合體外抑酶及腫瘤細胞增殖抑制活性評價的結果,選取化合物3-209進行了人急性髓系白血病MV-4-11 Ba1b/c裸小鼠皮下移植瘤的生長抑制作用測試。結果顯示,該化合物具有顯著的抑制白血病腫瘤組織生長的能力,抑瘤率達83.81%,且受試動物體重未見明顯下降。對化合物3-94和3-209的初步藥代動力學性質評價結果表明,化合物3-209 口服無吸收,但化合物3-94具有一定的口服生物利用度(F=37%),且靜脈注射給藥后表現(xiàn)出了更好的藥代動力學性質,內蒙古氨基嘧啶為進一步體內藥效學評價及后續(xù)作用機制的研究奠定了基礎。